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2025年 04期

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栽培与饲养

草珊瑚扦插育苗技术研究

黄意成;景志贤;张小波;

目的 研究草珊瑚扦插繁殖影响因素,探究其影响大小和最佳因素组合。方法 采用四因素三水平正交试验方法,以愈伤组织形成率、发芽率、生根率、根数、平均根长为检验评价指标,探究基质种类(A)、激素类型(B)、激素浓度(C)和插穗部位(D)对草珊瑚繁殖效果的影响。结果 草珊瑚扦插繁殖影响最大的是插穗部位,其次是基质种类,激素类型和浓度的影响最小。生根效果指标最优组合因素是A1B1C1D1,愈伤组织形成率87.83%,发芽率96.07%,生根率96.04%,生根数11.81根,平均根长8.09 cm。结论 草珊瑚可采用扦插方式进行育苗,此方法投入少、见效快、应用广、可操作性强,适合草珊瑚种苗的批量生产。

2025 年 04 期 v.39 ; 国家自然科学基金项目(82274052); 中国中医科学院科技创新工程(CI2023E002); 国家人口健康科学院数据中心项目“中药资源信息整合”(NCMI202406A04); 科技部科技基础资源调查专项(2022FY101000)
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道地药材云当归种子萌发影响因素研究

杨丽云;陈翠;程远辉;康平德;戚淑威;杨文宏;杨少华;

目的 探究影响云当归种子萌发的因素,为规范化种植提供依据。方法 采用培养皿萌发测定法研究不同贮存时间、光照、温度、种子成熟度对云当归种子萌发的影响。结果 云当归种子成熟采收后即能发芽,发芽率为79.00%。贮存120 d发芽率最高,发芽率达80.33%。贮存180 d后发芽势和发芽率急剧下降,贮存660 d发芽率仅为10.67%。光照对云当归种子萌发无显著影响。15 ℃种子发芽势和发芽率最高,发芽率达90.00%。初熟程度种子发芽势和发芽率最高,发芽率达89.67%。结论 云当归种子无后熟休眠特性,自然贮存寿命较短,属于光中性短命种子。云当归种子萌发最适温度为15 ℃,高温不利于其种子萌发。种子成熟度对萌发有显著影响,初熟程度的发芽势和发芽率最高,随着成熟度的增加,发芽势和发芽率下降。

2025 年 04 期 v.39 ; 云南重大科技专项计划(202204BP090001);云南重大科技专项计划(202402AA310031); 丽江现代中药材产业技术体系综合试验站(丽财农[2023]106号); 高山农业科技创新及成果展示转化专项经费(云财农[2024]5号)
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药理

基于PI3K/AKT信号通路探讨三化汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制

张楠;高玉菊;胡蝶;盛竹君;杨晓丹;张梦翔;杨满琴;韩明辰;

目的 探讨三化汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)作用机制。方法 采用网络药理学筛选三化汤抗CIRI的活性成分、作用靶点及信号通路。通过Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,诱导CIRI,给予尼莫地平/不同剂量组三化汤治疗之后,进行神经功能缺损评分,2,3,5-三苯四氮唑(TTC)法检测脑梗死体积,苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理损伤,TUNEL染色评估神经元凋亡程度,化学比色法评价氧化应激相关标志物水平,ELISA法测定炎症因子水平,Western Blot法测定脑组织中细胞凋亡和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白的表达水平。结果 网络药理学结果显示,共筛选出三化汤有效成分66个及相关靶点705个,CIRI相关靶点1 267个,交集靶点171个。其中,核心成分包括橘皮素、芹菜素和香叶木素等;核心靶点主要有蛋白激酶B-1(AKT1)、胱天蛋白酶3 (CASP3)与B细胞淋巴瘤-2(BCL2)等;关键通路有PI3K/AKT信号通路等。动物实验结果显示,三化汤能够减轻CIRI大鼠神经功能缺损,减小脑梗死体积及病理损伤并降低神经元凋亡程度。此外,三化汤可以改善CIRI大鼠氧化应激反应,显著降低丙二醛(MDA)水平,同时升高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)与过氧化氢酶(CAT)水平,还可以显著降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平并升高IL-10水平。同时,三化汤能上调p-PI3K、p-AKT及Bcl-2的表达,并下调Bax和Caspase-3蛋白的表达。结论 三化汤通过发挥抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡作用以及调控PI3K/AKT信号通路来改善脑缺血再灌注大鼠的脑组织损伤。

2025 年 04 期 v.39 ; 安徽省高校自然科学研究重点项目(2022AH050451); 安徽中医药大学自然科学研究重点项目(2021efylc10);安徽中医药大学自然科学研究项目(2020efyzc13)
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基于转录组学与代谢组学对甘草地上部分提取物改善慢性前列腺炎作用机制研究

云鹭;张艳;施露;夏涛;廖菁;王文全;侯俊玲;

目的 探究甘草地上部分提取物(GU)对于角叉菜胶诱导的大鼠慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)的作用机制。方法 采用乙醇提取后水沉的方法制备GU,测定其总黄酮含量确定给药量。建立角叉菜胶诱导的CP/CPPS大鼠模型,将大鼠分为对照组、假手术组、模型组和给药组,连续灌胃给药14 d,测量GU对CP/CPPS大鼠的前列腺系数、血清中IL-6和TNF-α的水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠前列腺组织内病理学变化。结合转录组学和代谢组学对大鼠前列腺组织进行测序和筛选差异代谢物,进行相关性分析获得关键基因。结果 血清生化结果表明,GU降低了CP/CPPS大鼠血清内IL-6和TNF-α的水平,降低了炎症反应。HE结果表明GU显著减少了CP/CPPS大鼠前列腺组织内炎症细胞的浸润。代谢组学和转录组学联合分析筛选出SOCS3、FXYD5、AIM2、PLA2G2A、CXCL1和HSD17B6共6个关键基因。差异基因的KEGG富集于病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用、NF-κB 等信号通路,差异代谢物的KEGG富集与精氨酸生物合成,丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢过程密切相关。结论 GU可能通过抑制角叉菜胶诱导的CP/CPPS大鼠的炎症反应、细胞增殖等过程发挥抗CP/CPPS作用。

2025 年 04 期 v.39 ; 国家重点研发计划项目(2018YFC1706500); 国家工信部中药材提升和保障项目(2020071620161); 北京中医药大学22年度纵向科研发展基金(90020272120022)
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和中降浊调糖颗粒对2型糖尿病小鼠肠屏障和肠道炎症的改善作用研究

郭育坤;庞国明;李鹏辉;孙太蒙;马睿琛;李方旭;谢欣梅;庞晓斌;周云丰;

目的 探讨和中降浊调糖颗粒(HZJZ颗粒)对2型糖尿病(T2DM)小鼠肠屏障的保护作用及缓解炎症的机制。方法 利用高脂高糖饮食+链脲佐菌素构建T2DM小鼠模型,随机分为对照组、T2DM组、HZJZ颗粒低剂量组(6 g/kg)、HZJZ颗粒高剂量组(12 g/kg)和二甲双胍组(200 mg/kg)。给药5周后,检测小鼠空腹血糖(FBG)和口服葡萄糖耐量(OGTT),利用ELISA法检测血清和肠道中LPS及炎症因子的水平,采用HE和AB-PAS染色观察小鼠结肠组织结构变化,利用Western Blot和免疫荧光染色检测肠屏障完整性和炎症相关蛋白的表达水平。结果 HZJZ颗粒能显著降低T2DM小鼠FBG并改善糖耐量异常;同时,给药组小鼠结肠组织杯状细胞和隐窝数目增加,肠屏障相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1表达增加,结肠组织细胞凋亡受抑制;进一步研究发现HZJZ 颗粒降低T2DM小鼠 LPS、IL-6和TNF-α水平,增加IL-10含量,降低TLR4、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白表达。结论 HZJZ颗粒能通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制T2DM小鼠肠道过度的炎症反应,增强肠道屏障的完整性,从而改善T2DM。

2025 年 04 期 v.39 ; 河南省中医药科学研究重点课题(2023ZY1028); 河南省科技攻关计划项目(202102310370)
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基于计算机辅助药物设计筛选中药单体中的法尼醇受体抑制剂

黄圣;冯丽娜;林茂炫;徐润冰;刘澜月;贺柏翔;王润泽;张智龙;崔玉石;陈晔欣;郭一;杜宏波;

目的 利用计算机辅助药物设计技术挖掘拮抗细胞毒性胆汁酸的中药单体成分抑制剂。方法 使用三维定量构效关系(3D-QSAR)学习34个已有的法尼醇受体(FXR)抑制剂的药效团特征,建立机器预测模型,搭配药代动力学预测(ADMET)来虚拟筛选13 144个中药单体,得到候选化合物。随后,以分子对接和分子动力学模拟为方法,模拟候选化合物、FXR激动剂鹅去氧胆酸(CDCA)、FXR抑制剂(Z)-Gugglesterone对FXR配体结构域的竞争性结合,以及对转录复合物结构稳定性的影响。结果2 436个中药单体通过了机器预测筛选,具备FXR抑制剂药效团特征;随后选取IC50预测值位于前300名(IC50 < 0.286 nM)的单体进行ADMET预测,最终苦参啶被虚拟筛选为候选化合物,ADMET结果表明,苦参啶具有良好的类药性、口服吸收能力和低毒性。分子对接和动力学模拟结果显示,苦参啶能以更强力的方式和CDCA、(Z)-Gugglesterone竞争FXR的相同结合位点,强力减弱FXR和共激活因子之间的结合。结论 苦参啶有潜力成为强效FXR抑制剂的先导化合物,该研究结合了基于配体和结构的计算机辅助药物设计,为进一步的实验验证提供理论依据。

2025 年 04 期 v.39 ; 内蒙古自治区卫生健康委员会公立医院科研联合基金科技项目(2024GLLH1364)
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成分与质量

高效液相色谱法同时测定牛黄解毒制剂中9个成分的含量

王倩倩;柴晓钰;郝春晖;王新宇;李雪岩;祁东盈;易紫容;刘欢;刘洋;潘艳丽;

目的 建立牛黄解毒制剂中9个指标成分的高效液相色谱(HPLC)含量测定方法。方法 采用Xbridge C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.30 mL/min;柱温为30 ℃;254和280 nm双波长检测。应用所建立的HPLC方法对市售四种牛黄解毒制剂(丸、片、胶囊和软胶囊)11个厂家样品中9个成分进行含量测定。结果 经方法学验证各项指标均合要求。11个厂家牛黄解毒制剂中9个指标成分含量范围为:黄芩苷6.78 ~ 22.03 mg/g、汉黄芩苷1.52 ~ 5.94 mg/g、黄芩素0.33 ~ 2.72 mg/g、甘草酸0.41 ~ 2.85 mg/g、芦荟大黄素0.06 ~ 0.84 mg/g、大黄酸0.10 ~ 1.07 mg/g、大黄素0.08 ~ 1.24 mg/g、大黄酚0.80 ~ 6.55 mg/g、大黄素甲醚0.10 ~ 0.85 mg/g。结论 所建立的HPLC含量测定方法技术简单、灵敏度高、重复性好,可用于牛黄解毒制剂的质量评价。

2025 年 04 期 v.39 ; 中国中医科学院创新基金项目(CI2021A00511)
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酒多花黄精化学成分研究

朱生良;胡华萍;张意;陆彩侠;王仁中;吴德玲;许凤清;

目的 研究酒多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的化学成分。方法 采用硅胶、凝胶、半制备型HPLC等色谱技术对酒多花黄精50%乙醇提取物进行分离纯化,并利用1H-NMR、13C-NMR、MS等技术结合文献数据对所得化合物的结构进行鉴定。结果 从酒多花黄精50%乙醇提取物中分离得到17个化合物,分别鉴定为4-[formyl-5-(methoxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl](1)、5,5'-((((5-(hydroxymethyl)furan-2-yl)methylene)bis(oxy))bis(methylene))bis(furan-2-carbaldehyde)(2)、4-hydroxy-5-methylfuran-3-caboxylic acid(3)、5-羟甲基糠醛(4)、(2S,4S)-4-hydroxytetrahyrofuran-2-carboxylic acid(5)、5-(hydromethyl)-2-carboxylic acid(6)、methyl 5-(hydroxymethyl)furan-2-carboxylate(7)、5-(hydroxymethyl)-1H-pyrrol-2-yl-methanediol(8)、黄精碱A(9)、polygonatine N4(10)、焦谷氨酸甲酯(11)、焦谷氨酸丁酯(12)、N-反式阿魏酰酪胺(13)、对羟基苯乙醇(14)、4',5,7-三羟基-6,8-二甲基高异黄酮(15)、邻苯三酚(16)和对羟基苯甲醛(17)。结论 化合物1 ~ 3、5 ~ 8、12和16 ~ 17为首次从多花黄精的炮制品中分离得到。

2025 年 04 期 v.39 ; 安徽省高校协同创新项目(GXXT-2022-066)
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制剂与工艺

裸花紫珠叶抗肿瘤活性部位提取工艺研究

耿豫;莫心怡;陈路;

目的 探讨裸花紫珠叶抗肿瘤活性部位的提取工艺。方法 采用MTT比色法对裸花紫珠叶醇提物的不同溶剂萃取物进行抗肿瘤活性测定。选择料液比、提取次数、提取时间、乙醇浓度作为影响因素,以总黄酮含量为指标,采用Box-Behnken设计优化活性部位的提取工艺。结果 乙酸乙酯萃取部位(EAE)对人乳腺癌MCF-7细胞、卵巢癌OVCAR-3细胞和宫颈癌C-33A细胞的增殖具有抑制作用,其IC50值分别为(38.96±2.42)μg/mL、(5.15±3.07)μg/mL、(26.33±1.46)μg/mL(72 h)。活性部位EAE最佳提取工艺为:料液比为1∶20,提取次数为2次,提取时间为2 h,乙醇浓度为70%。结论 裸花紫珠叶乙酸乙酯萃取部位具有一定的抗肿瘤活性,其提取工艺经Box-Behnken设计优化后具有更高的提取率,且工艺稳定,可预测性好,值得推广应用。

2025 年 04 期 v.39 ; 中央引导地方科技发展资金项目(桂科ZY21195044); 广西科技计划项目(桂科AD18126013)
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基于AHP-EWM结合Box-Behnken响应面法优化桂龙巴布贴的提取工艺

邱建永;王思丰;李智勇;张建军;

目的 优化桂龙巴布贴提取工艺参数。方法 以HPLC法测定方中桂皮醛(Cin)、香蒲新苷(Typ)、异鼠李素-3-O-新橙皮苷(Iso)含量及干膏率为评价指标,采用层次分析-熵权法(AHP-EWM)对权重系数进行计算,结合响应面法(Box-Behnken)优选桂龙巴布贴提取工艺。结果 确定Cin、Typ、Iso含量、干膏率的权重系数分别为0.844 5、0.091 5、0.056 4、0.007 6。经综合评分后,建立了预测数学模型。确定最佳工艺为优选的工艺为:加水回流提取2次,每次加10倍量水,提取70 min,滤过。在此条件下的综合评分为98.702,与模型预测值99.361差值较小,RSD小于3%,工艺稳定。结论 拟定的桂龙巴布贴提取工艺稳定可行,为临床更好地开发利用桂龙巴布贴提供了科学依据和技术支持。

2025 年 04 期 v.39 ; 广东省科技计划项目(2017A070701017)
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