2026年 01期
邻苯二甲酸二丁酯对丹参生长、光合特性及有效成分含量的影响
韩文英;周冰谦;朱洪征;董红敬;耿岩玲;李圣波;刘伟;目的 研究不同浓度邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对丹参种子萌发、幼苗生长及有效物质积累的影响。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)评价DBP对丹参幼苗中有效成分(丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及脂溶性总成分)含量的影响,并结合测定指标进行相关性分析。结果 DBP对丹参种子萌发、幼苗生长及生理活性等表现出不同的化感效应。DBP对种子萌发率呈现出“低促高抑”的影响,而对幼苗根中POD、SOD、PPO和CarE酶活性呈正向影响,其中0.8 mmol/L DBP处理下CarE酶活性较CK提升60.16%;幼苗光合作用强度与DBP浓度呈反向影响,随着DBP浓度增加,幼苗光合参数及叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量均有不同程度下降;DBP对幼苗有效物质的含量影响不一致,隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及脂溶性总成分在0.2 mmol/L DBP处理下均有所增加(2.99%~45.14%),但丹酚酸B的含量受到一定程度抑制。相关性分析表明,大部分测定指标之间存在显著或极显著相关。结论 低浓度DBP(0.2mmol/L)对丹参种子萌发及脂溶性成分的积累起到正向促进作用,但随DBP浓度增加其抑制作用逐渐显著。推测根系分泌物DBP通过抑制幼苗光合作用进而影响丹参生长代谢过程,阻碍其生物量及丹酚酸B有效成分的积累,从而成为诱发连作障碍的关键因素之一。
鸡血藤转录组学分析及次生代谢产物合成相关基因挖掘
胡筱希;黄建猷;陆国寿;黄周锋;赖克道;目的 对鸡血藤进行转录组测序,挖掘其次生代谢产物合成相关基因及分子基础。方法 采用illumina novaseq平台对鸡血藤进行转录组测序。使用Trinity(v2.5.1)软件对获得的Unigenes数据进行过滤组装,使用DIAMOND(v2.0.4)软件将Unigenes序列进行注释,使用KOBAS(v3.0)软件得到Unigenes在KEGG中的KEGG Orthology结果,利用鉴定单重复序列的软件MISA(v1.0)(microsatellite identification tool)对转录组数据中的Unigenes进行SSR位点的检测。结果 组装后共获得52 115条Unigenes,其中得到34 774条Unigene的注释结果。参与编码苯丙素类化合物紫丁香苷生物合成途径的8种关键酶,共涉及66条Unigenes,编码黄酮类生物合成途径的10种关键酶,共涉及36条Unigenes,编码萜类生物合成途径的11种关键酶,共涉及32条Unigenes。利用鉴定单重复序列的软件MISA(microsatellite identification tool),共发现7 901个SSRs位点。结论 通过高通量转录组测序,初步揭示了鸡血藤次生代谢产物合成相关的基因,为进一步研究鸡血藤次生代谢产物合成途径关键酶的功能及其调控机制奠定了基础。
基于HS-SPME-GC-MS和高通量测序技术探究标准仓储环境下广陈皮陈化机制
商雪莹;陈明权;刘国伟;张永涛;何风雷;目的 研究在标准仓储环境中透气性对广陈皮整体真菌群落的影响,及陈化过程中真菌群落和挥发性成分之间的联系。方法 采用高通量测序技术分析各样品整体真菌群落组成及动态变化情况,通过HS-SPME-GC-MS对挥发性成分进行分离和鉴定,并进行相关性分析。结果 柑皮与密封态下储存的样品的真菌群落以多菌属共存为特征,陈化3年以上的广陈皮可形成以Xeromyces为绝对优势菌群的平衡稳态。挥发性成分的种类会随着陈化年份的增加出现先升后降的趋势,陈化5年成分种类达到峰值,Fusarium是唯一与陈化年份、烯烃类、醇类、酯类成分相对含量显著相关的菌属。结论 透气性是广陈皮在陈化过程中出现真菌群落差异的关键因素,可诱导Xeromyces优势菌群的富集,促进2-(甲氨基)苯甲酸甲酯的积累,关键真菌属Fusarium与Xeromyces此消彼长,并与关键性成分D-柠檬烯、γ-萜品烯的降解直接相关,对广陈皮的陈化年份鉴定和陈化工艺优化均有较大的意义。
黄芪甲苷抑制肺成纤维细胞转分化减轻小鼠特发性肺纤维化的作用机制研究
郭晓菲;刘震;商艳;徐保利;目的 基于Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路探讨黄芪甲苷(Ast)抑制肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞改善小鼠特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法 将24只C57BL/6小鼠随机分为模型组、Ast组、Ast+Colivelin(JAK2激动剂)组,采用第1、7、14天予以气管滴注博来霉素(4 mg/kg)构建IPF小鼠模型,造模完成后,各组小鼠给予相应药物干预,连续给药21 d。另取8只同龄小鼠作为对照组。苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;马松(Masson)染色观察肺组织纤维化情况;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平;试剂盒检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的表达水平;免疫组织化学染色检测各组肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ)及转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达水平;Western Blot检测肺组织中JAK2、STAT3、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达水平。结果 Ast干预后肺组织病理损伤与纤维化明显减轻,IL-6、IL-1β、TNF-α、HYP表达水平显著降低(P<0.05),肺组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、TGF-β1表达水平显著降低(P<0.05),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比例显著降低(P<0.05);而Colivelin能部分逆转Ast对上述指标的调控作用。结论 Ast可有效缓解IPF小鼠的炎症反应,抑制肺成纤维细胞的转分化过程,进而减轻小鼠IPF程度,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。
基于网络药理学探索鹿茸“补肾健骨”的功效及作用机制研究
王俊凤;崔圆;王思明;刘美辰;潘黛安;目的 基于网络药理学和体内动物实验探索鹿茸“补肾健骨”的作用靶点,揭示其潜在的作用机制。方法 利用BATMAN-TCM数据库筛选鹿茸的活性成分和候选靶点;利用GeneCards数据库和OMIM数据库分别对肾阳虚(Kidney yang deficiency,KYD)和骨质疏松(Osteoporosis,OP)的基因靶点进行预测;借助Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-成分-靶点-疾病”的调控网络图;利用STRING数据库对筛选到的共同作用靶点构建PPI网络;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO和KEGG富集分析;建立肾阳虚大鼠的骨质疏松模型,检测鹿茸提取物对大鼠体质量、血清激素水平、骨代谢水平及骨形态参数的影响,以及核心靶点基因的表达水平、PI3K/Akt信号通路的蛋白水平。结果 最终得到鹿茸核心功效成分12个,筛选出鹿茸“补肾健骨”的核心作用靶点23个,主要参与PI3K/Akt等信号通路;动物实验证实鹿茸提取物能够显著恢复肾阳虚大鼠的体质量等肾阳虚状态,恢复大鼠的激素水平和骨代谢指标,改善大鼠的骨质疏松症状,同时q-PCR和Western Blot结果验证了网络预测的准确性。结论 探索了鹿茸发挥“补肾健骨”功效的潜在靶点和作用机制,其结果为相关药物的开发和临床应用奠定了基础。
白术通过PI3K/Akt信号通路保护药物诱导的早孕流产模型大鼠作用研究
唐让让;陶红;苏晴;李丽丽;黄琪;胡雨;目的 研究白术保护药物诱导早孕流产模型大鼠作用及其潜在机制。方法 取同一天受孕的雌性大鼠灌胃米非司酮(11.5 mg/kg)和米索前列醇(125μg/kg)建立早孕流产大鼠模型,将流产大鼠分为模型组,白术水提液低(0.6 g/kg)、中(1.2 g/kg)、高(2.4 g/kg)剂量组及阳性对照组(地屈孕酮片,3.02mg/kg);另取10只正常受孕大鼠仅灌胃生理盐水作为假手术组;机制验证研究部分,以LY294002为抑制剂组。末次给药30 min后,各大鼠以戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻醉,计算各大鼠体质量、胚胎数目和胚胎吸收率。腹主动脉取血,取大鼠子宫组织,HE染色法观察大鼠子宫胎盘组织病理变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清及子宫组织中孕酮(Progesterone,P)、人绒毛膜促性腺激素(β-Human Chorionic Gonadotropin, β-HCG)的水平;ELISA法检测大鼠子宫组织中白介素10(IL-10)、白介素17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)的水平。转录组学测定不同组别相关基因表达,KEGG和GO富集分析预测白术可能作用途径。Western Blot法测定相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,流产大鼠体质量明显下降,胚胎个体小、颜色呈黑褐色且部分出血坏死,胚胎吸收率显著升高,子宫胎盘组织组结构紊乱,相关细胞排列混乱,组织边界模糊,胎盘迷路受损,血管网血窦减少;此外模型组大鼠子宫及血清中P、β-HCG激素水平明显降低,血清中IL-10水平明显降低,血清中IL-17、TGF-β水平明显升高。与模型组相比,白术水提液各剂量组可明显升高大鼠体质量,明显降低胚胎吸收率,改善子宫组织损伤,明显升高P、β-HCG等激素水平及IL-10的水平,降低IL-17、TGF-β等炎性因子水平。转录组学分析结果显示,PI3K/Akt信号通路为白术潜在作用途径。Western Blot验证实验结果显示,与模型组相比,白术水提液可明显升高p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT比值水平,然而此种作用可被PI3K特异性抑制剂LY294002所抑制。结论 白术水提液具有保护早孕流产模型大鼠作用,其作用与调控PI3K/Akt有关信号通路有关。
诃子及其主要成分抗氧化、抗炎活性研究
覃丽娜;安悦言;张强;柳羽涵;孙迪;王巍;目的 研究诃子及其主要成分体内外的抗炎、抗氧化活性。方法 采用DPPH法、ABTS法、总还原能力测定法,评估体外抗氧化活性;以脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,分别以不同浓度的诃子及诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸干预细胞,采用CCK-8法确定给药浓度,检测一氧化氮(NO)含量,评估诃子及其主要成分的体外抗炎活性;采用LPS法复制小鼠炎症模型,灌胃给予诃子及其主要成分,观察小鼠体质量变化,测定肺脏、肝脏湿干质量比,观察肺脏和肝脏的病理状态,并对血清与肺脏中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-10)和氧化应激因子(T-AOC、SOD、MDA)的水平进行测定。结果 诃子及其主要成分对DPPH自由基、ABTS自由基均具有较好的清除能力,诃子、诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸的总还原力C0.5分别为28.70μg/mL、20.93μg/mL、22.54μg/mL、11.10μg/mL、15.08μg/mL。CCK-8法筛选得到诃子、诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸的最大给药浓度分别为25μg/mL、30μM、60μM、15μM、15μM。与模型组比较,各给药组NO含量明显降低(P<0.01、P<0.001),并呈现出一定剂量依赖性。体内炎症模型结果显示,与模型组比较,诃子及其主要成分能够恢复小鼠体质量,改善肺脏、肝脏水肿及病理损伤,不同程度提高机体IL-10、T-AOC、SOD水平,降低TNF-α、IL-1β、MDA水平。结论 诃子及其主要成分具有较好的体内外抗氧化、抗炎活性,本研究可为开发天然抗氧化、抗炎药物提供理论基础。
川渝特色黑豆汁炮制对滇黄精化学成分及体外抗氧化活性的影响研究
王佳煜;于淑琳;冯婧;王语诗;梁如;袁久懿;杨瑞琦;郭星妤;陈欣;拱健婷;邹慧琴;目的 探究川渝特色黑豆汁炮制对滇黄精化学成分及体外抗氧化活性的影响。方法 采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),对生黄精、黑豆汁制黄精(制黄精)成分进行分析。通过DPPH、OH~-、ABTS自由基清除实验开展体外抗氧化活性研究,结合灰色关联度法解析生、制黄精主要差异化学成分与体外抗氧化活性的谱效关系。结果 鉴定出生、制黄精共95种化学成分,显著差异成分46种,包括氨基酸及衍生物9种、核苷及衍生物4种、有机酸类12种、脂肪酸类1种、黄酮类6种、生物碱类2种、糖类1种、其它成分11种。自由基清除实验表明,炮制后黄精体外抗氧化能力呈质量浓度依赖性趋势增强。相关性分析表明,5-羟甲基糠醛、6,7-二羟基-4-甲基香豆素、黄精碱A、大豆苷元等12种化学成分与体外抗氧化活性密切相关。结论 川渝特色黑豆汁炮制明显影响黄精的化学成分及抗氧化活性,其中小分子糖类、苷元类、生物碱类与有机酸类成分升高,部分氨基酸类与苷类成分降低,抗氧化活性增强。该研究为后续探究黄精黑豆汁炮制前后药效变化与饮片质量评价奠定基础。
金盏银盘化学成分研究
高巍;刘毅;楚庆霞;廉艳锋;唐莉;仰铁锤;柳朝;温建云;杨柳;闫士猛;目的 研究菊科鬼针草属植物金盏银盘Bidens biternata(Lour.) Merr.&Sherff.的化学成分。方法 采用不同溶剂提取,通过GC-MS对金盏银盘全草的化学成分进行分析;采用95%乙醇提取,运用多种色谱技术进行分离和纯化,利用NMR波谱数据对化合物的化学结构进行鉴定。结果 采用GC-MS联用技术从金盏银盘石油醚、乙醚、正己烷回流提取物中分别鉴定出60种、54种、30种化合物。从金盏银盘中得到5个化合物,分别鉴定为脱镁叶绿素a(Ⅰ)、1-氨基-1,2,3-三唑(Ⅱ)、stigmast-4,6,8(14)-22-tetraen-3-one(Ⅲ)、stigmasta-4,22-dien-3-one(Ⅳ)、8,3'-dihydroxy-3,7,4'-trimethoxy-6-O-β-D-glucopyranosylfavone(Ⅴ)。结论 金盏银盘石油醚、乙醚、正己烷回流提取物均含有大量的烷烃类、酸类、烯烃类、脂类,其中含量较高的是棕榈酸、7,9-二叔丁基-1-氧杂螺环、邻苯二甲酸等。利用NMR鉴定的化合物Ⅰ~Ⅴ均为首次从金盏银盘中分离得到。
基于质量源于设计理念的香菊片提取工艺研究
马爱华;雷璇;宋逍;宋格艳;张爱花;目的 优化香菊片的提取工艺。方法 基于质量源于设计理念,以干膏率及没食子酸、鞣花酸和木犀草素的含量作为香菊片提取工艺的关键质量属性(CQAs),采用Plackett-Burman试验设计筛选关键工艺参数(CPPs)。通过Box-Behnken设计建立数学模型,考察CPPs与CQAs之间的交互作用,优选香菊片的提取工艺。结果 Plackett-Burman试验设计筛选出提取次数、醇沉浓度和加水量为主要影响因素,响应面方差分析结果表明所建模型具有统计学意义。得到最佳提取工艺为加水量13倍、醇沉浓度60%、提取2次,所得制剂干膏率为5.319%。结论 经过优化后得到了香菊片的最优提取工艺,验证试验的真实值与预测值接近,工艺稳定可靠,可为后续片剂的研究开发奠定基础。