目的 研究诃子及其主要成分体内外的抗炎、抗氧化活性。方法 采用DPPH法、ABTS法、总还原能力测定法,评估体外抗氧化活性;以脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,分别以不同浓度的诃子及诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸干预细胞,采用CCK-8法确定给药浓度,检测一氧化氮(NO)含量,评估诃子及其主要成分的体外抗炎活性;采用LPS法复制小鼠炎症模型,灌胃给予诃子及其主要成分,观察小鼠体质量变化,测定肺脏、肝脏湿干质量比,观察肺脏和肝脏的病理状态,并对血清与肺脏中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-10)和氧化应激因子(T-AOC、SOD、MDA)的水平进行测定。结果 诃子及其主要成分对DPPH自由基、ABTS自由基均具有较好的清除能力,诃子、诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸的总还原力C0.5分别为28.70μg/mL、20.93μg/mL、22.54μg/mL、11.10μg/mL、15.08μg/mL。CCK-8法筛选得到诃子、诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸的最大给药浓度分别为25μg/mL、30μM、60μM、15μM、15μM。与模型组比较,各给药组NO含量明显降低(P<0.01、P<0.001),并呈现出一定剂量依赖性。体内炎症模型结果显示,与模型组比较,诃子及其主要成分能够恢复小鼠体质量,改善肺脏、肝脏水肿及病理损伤,不同程度提高机体IL-10、T-AOC、SOD水平,降低TNF-α、IL-1β、MDA水平。结论 诃子及其主要成分具有较好的体内外抗氧化、抗炎活性,本研究可为开发天然抗氧化、抗炎药物提供理论基础。
目的 优化香菊片的提取工艺。方法 基于质量源于设计理念,以干膏率及没食子酸、鞣花酸和木犀草素的含量作为香菊片提取工艺的关键质量属性(CQAs),采用Plackett-Burman试验设计筛选关键工艺参数(CPPs)。通过Box-Behnken设计建立数学模型,考察CPPs与CQAs之间的交互作用,优选香菊片的提取工艺。结果 Plackett-Burman试验设计筛选出提取次数、醇沉浓度和加水量为主要影响因素,响应面方差分析结果表明所建模型具有统计学意义。得到最佳提取工艺为加水量13倍、醇沉浓度60%、提取2次,所得制剂干膏率为5.319%。结论 经过优化后得到了香菊片的最优提取工艺,验证试验的真实值与预测值接近,工艺稳定可靠,可为后续片剂的研究开发奠定基础。
白芍作为传承千载的经典中药,其药用价值在抗炎抗氧化、抗肿瘤、肝脏保护及代谢调节、神经保护等多重药理活性中得到现代科学验证,彰显出传统医药与现代研究的深度契合。通过系统梳理白芍单味药的药理作用,阐明其多靶点调控特征,着重解析其与桂枝、当归、白术、柴胡、黄芩等药物的经典配伍体系,整合现代研究成果,进一步揭示其配伍规律与作用特点,从而为优化白芍药对的临床应用及新药研发提供科学参考。
目的 基于Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路探讨黄芪甲苷(Ast)抑制肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞改善小鼠特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法 将24只C57BL/6小鼠随机分为模型组、Ast组、Ast+Colivelin(JAK2激动剂)组,采用第1、7、14天予以气管滴注博来霉素(4 mg/kg)构建IPF小鼠模型,造模完成后,各组小鼠给予相应药物干预,连续给药21 d。另取8只同龄小鼠作为对照组。苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;马松(Masson)染色观察肺组织纤维化情况;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平;试剂盒检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的表达水平;免疫组织化学染色检测各组肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ)及转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达水平;Western Blot检测肺组织中JAK2、STAT3、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达水平。结果 Ast干预后肺组织病理损伤与纤维化明显减轻,IL-6、IL-1β、TNF-α、HYP表达水平显著降低(P<0.05),肺组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、TGF-β1表达水平显著降低(P<0.05),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比例显著降低(P<0.05);而Colivelin能部分逆转Ast对上述指标的调控作用。结论 Ast可有效缓解IPF小鼠的炎症反应,抑制肺成纤维细胞的转分化过程,进而减轻小鼠IPF程度,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。
桃红四物汤方名始载于《医宗金鉴》,由四物汤(熟地、当归、白芍、川芎)加桃仁、红花组成,以桃仁、红花为君,熟地、当归为臣,白芍为佐,川芎为使,六药合用共奏养血生血,祛瘀活血而使气机和畅的作用。中医学认为,血管疾病属血脉病范畴,其主要发病机制为痰结血瘀,故其治疗常聚焦于活血化瘀。研究发现,桃红四物汤单用或联合用药可用于治疗部分血管性疾病,且目前研究多侧重于糖尿病微血管病变、视网膜静脉阻塞、缺血性脑卒中、心力衰竭四类,其作用机制与抗炎、抗氧化应激、抗凋亡、抑制血管新生,进而改善血液流变学水平、内皮细胞功能等有关。因此,归纳总结了桃红四物汤治疗糖尿病微血管病变、视网膜静脉阻塞、缺血性脑卒中、心力衰竭这4类血管疾病的作用机制研究现状,为临床治疗提供理论研究基础。
目的 研究白术保护药物诱导早孕流产模型大鼠作用及其潜在机制。方法 取同一天受孕的雌性大鼠灌胃米非司酮(11.5 mg/kg)和米索前列醇(125μg/kg)建立早孕流产大鼠模型,将流产大鼠分为模型组,白术水提液低(0.6 g/kg)、中(1.2 g/kg)、高(2.4 g/kg)剂量组及阳性对照组(地屈孕酮片,3.02mg/kg);另取10只正常受孕大鼠仅灌胃生理盐水作为假手术组;机制验证研究部分,以LY294002为抑制剂组。末次给药30 min后,各大鼠以戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻醉,计算各大鼠体质量、胚胎数目和胚胎吸收率。腹主动脉取血,取大鼠子宫组织,HE染色法观察大鼠子宫胎盘组织病理变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清及子宫组织中孕酮(Progesterone,P)、人绒毛膜促性腺激素(β-Human Chorionic Gonadotropin, β-HCG)的水平;ELISA法检测大鼠子宫组织中白介素10(IL-10)、白介素17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)的水平。转录组学测定不同组别相关基因表达,KEGG和GO富集分析预测白术可能作用途径。Western Blot法测定相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,流产大鼠体质量明显下降,胚胎个体小、颜色呈黑褐色且部分出血坏死,胚胎吸收率显著升高,子宫胎盘组织组结构紊乱,相关细胞排列混乱,组织边界模糊,胎盘迷路受损,血管网血窦减少;此外模型组大鼠子宫及血清中P、β-HCG激素水平明显降低,血清中IL-10水平明显降低,血清中IL-17、TGF-β水平明显升高。与模型组相比,白术水提液各剂量组可明显升高大鼠体质量,明显降低胚胎吸收率,改善子宫组织损伤,明显升高P、β-HCG等激素水平及IL-10的水平,降低IL-17、TGF-β等炎性因子水平。转录组学分析结果显示,PI3K/Akt信号通路为白术潜在作用途径。Western Blot验证实验结果显示,与模型组相比,白术水提液可明显升高p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT比值水平,然而此种作用可被PI3K特异性抑制剂LY294002所抑制。结论 白术水提液具有保护早孕流产模型大鼠作用,其作用与调控PI3K/Akt有关信号通路有关。
目的 探究川渝特色黑豆汁炮制对滇黄精化学成分及体外抗氧化活性的影响。方法 采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),对生黄精、黑豆汁制黄精(制黄精)成分进行分析。通过DPPH、OH~-、ABTS自由基清除实验开展体外抗氧化活性研究,结合灰色关联度法解析生、制黄精主要差异化学成分与体外抗氧化活性的谱效关系。结果 鉴定出生、制黄精共95种化学成分,显著差异成分46种,包括氨基酸及衍生物9种、核苷及衍生物4种、有机酸类12种、脂肪酸类1种、黄酮类6种、生物碱类2种、糖类1种、其它成分11种。自由基清除实验表明,炮制后黄精体外抗氧化能力呈质量浓度依赖性趋势增强。相关性分析表明,5-羟甲基糠醛、6,7-二羟基-4-甲基香豆素、黄精碱A、大豆苷元等12种化学成分与体外抗氧化活性密切相关。结论 川渝特色黑豆汁炮制明显影响黄精的化学成分及抗氧化活性,其中小分子糖类、苷元类、生物碱类与有机酸类成分升高,部分氨基酸类与苷类成分降低,抗氧化活性增强。该研究为后续探究黄精黑豆汁炮制前后药效变化与饮片质量评价奠定基础。
为明确蔓荆子的基原演变过程及分类学变迁,同时为其药材质量控制与临床合理应用提供科学依据,系统梳理历代本草文献记载,并结合现代分子系统学证据开展考证。结果表明,南北朝以前蔓荆子与牡荆子存在混用情况;唐代《新修本草》首次将单叶蔓荆(Vitex trifolia L. var. simplicifolia Cham.)确立为蔓荆子基原;明代《本草纲目》进一步明确蔓荆(Vitex trifolia L.)为另一基原,且APG IV系统将牡荆属归入唇形科的修订结论,得到bootstrap支持率> 85%的分子数据及相关化学特征的双重佐证。理清了蔓荆子的历史沿革、形态特征、产地及功效的演变脉络,明确了其基原与分类学变迁规律,为其资源开发与合理利用提供了理论支撑。
目的 研究在标准仓储环境中透气性对广陈皮整体真菌群落的影响,及陈化过程中真菌群落和挥发性成分之间的联系。方法 采用高通量测序技术分析各样品整体真菌群落组成及动态变化情况,通过HS-SPME-GC-MS对挥发性成分进行分离和鉴定,并进行相关性分析。结果 柑皮与密封态下储存的样品的真菌群落以多菌属共存为特征,陈化3年以上的广陈皮可形成以Xeromyces为绝对优势菌群的平衡稳态。挥发性成分的种类会随着陈化年份的增加出现先升后降的趋势,陈化5年成分种类达到峰值,Fusarium是唯一与陈化年份、烯烃类、醇类、酯类成分相对含量显著相关的菌属。结论 透气性是广陈皮在陈化过程中出现真菌群落差异的关键因素,可诱导Xeromyces优势菌群的富集,促进2-(甲氨基)苯甲酸甲酯的积累,关键真菌属Fusarium与Xeromyces此消彼长,并与关键性成分D-柠檬烯、γ-萜品烯的降解直接相关,对广陈皮的陈化年份鉴定和陈化工艺优化均有较大的意义。
目的 对鸡血藤进行转录组测序,挖掘其次生代谢产物合成相关基因及分子基础。方法 采用illumina novaseq平台对鸡血藤进行转录组测序。使用Trinity(v2.5.1)软件对获得的Unigenes数据进行过滤组装,使用DIAMOND(v2.0.4)软件将Unigenes序列进行注释,使用KOBAS(v3.0)软件得到Unigenes在KEGG中的KEGG Orthology结果,利用鉴定单重复序列的软件MISA(v1.0)(microsatellite identification tool)对转录组数据中的Unigenes进行SSR位点的检测。结果 组装后共获得52 115条Unigenes,其中得到34 774条Unigene的注释结果。参与编码苯丙素类化合物紫丁香苷生物合成途径的8种关键酶,共涉及66条Unigenes,编码黄酮类生物合成途径的10种关键酶,共涉及36条Unigenes,编码萜类生物合成途径的11种关键酶,共涉及32条Unigenes。利用鉴定单重复序列的软件MISA(microsatellite identification tool),共发现7 901个SSRs位点。结论 通过高通量转录组测序,初步揭示了鸡血藤次生代谢产物合成相关的基因,为进一步研究鸡血藤次生代谢产物合成途径关键酶的功能及其调控机制奠定了基础。